蛋白快速染色液(免脫色)用戶指南
產品概述
蛋白快速染色液(免脫色)是一款專為科研工作者設計的高效蛋白質染色試劑。該產品顯著縮短了傳統蛋白染色流程所需的時間,同時省略了繁瑣的脫色步驟,在保證高靈敏度和分辨率的前提下,極大地提高了實驗效率,適用于 SDS - PAGE(十二烷基硫酸鈉 - 聚丙烯酰胺凝膠電泳)等多種蛋白分離凝膠的染色分析。
技術原理
本染色其中的染色成分能夠特異性地與蛋白質分子結合。在染色過程中,染色劑通過靜電作用、疏水作用以及范德華力等多種分子間作用力,迅速且牢固地附著于蛋白質條帶之上。與傳統染色方法不同的是,該染色液中的添加劑能夠抑制背景染色,使得蛋白質條帶在凝膠背景中清晰呈現,無需額外的脫色步驟來去除背景雜色,從而實現快速、高對比度的染色效果。
產品特點
00001. 快速染色:相較于傳統染色方法數小時甚至過夜的染色時間,本染色液可大大節省實驗時間。
00001. 免脫色:創新配方使染色過程中背景染色得到有效控制,無需后續脫色操作,避免了因脫色過度或不足對實驗結果造成的影響,同時減少了實驗操作步驟和試劑消耗。
00001. 高靈敏度:能夠檢測到的蛋白質含量,可清晰分辨出不同分子量的蛋白質條帶,滿足科研對微量蛋白檢測的需求。
00001. 兼容性強:適用于各種常見的聚丙烯酰胺凝膠濃度,包括不同比例的分離膠和濃縮膠,且與多種蛋白樣品制備方法兼容。
使用方法
染色前準備
00001. 完成 SDS - PAGE 電泳后,小心取出凝膠,放入合適的染色容器中。建議使用塑料或玻璃容器,避免使用金屬容器以防染色液發生化學反應。
00001. 準備適量的蛋白快速染色液。根據凝膠的大小和數量,按照每平方厘米凝膠面積使用比例進行準備。
染色步驟
00001. 將準備好的蛋白快速染色液緩慢倒入裝有凝膠的容器中,確保凝膠浸沒在染色液中。染色液應覆蓋凝膠表面以保證染色均勻。
00001. 將容器置于水平搖床上,設置轉速,在室溫下染色。染色過程中,染色液中的成分會逐漸與蛋白質結合,蛋白質條帶將開始顯現。
結果觀察與記錄
00001. 染色完成后,直接將凝膠從染色液中取出,置于凝膠成像系統或透射式紫外分析儀下觀察。此時,蛋白質條帶應清晰可見,背景干凈。
00001. 使用凝膠成像軟件對結果進行拍照記錄。調整合適的曝光時間、對比度和亮度等參數,以獲取清晰、準確反映蛋白質條帶信息的圖像。建議保存原始圖像文件,以便后續分析。
注意事項
00001. 染色液具有一定的腐蝕性,使用時需佩戴手套、護目鏡等防護裝備,避免皮膚和眼睛直接接觸。如不慎接觸,應立即用大量清水沖洗,并及時就醫。
00001. 染色液應避光保存于 4℃冰箱中,使用前需恢復至室溫。避免反復凍融,以免影響染色效果。
00001. 不同品牌和批次的凝膠可能對染色效果有輕微影響。若使用新的凝膠產品,建議進行預實驗以優化染色條件。
00001. 染色后的凝膠和剩余染色液應按照實驗室化學廢棄物處理規定進行妥善處理,避免對環境造成污染。
常見問題及解決方法
00001. 染色條帶不清晰:可能原因是染色時間不足或染色液濃度過低。可適當延長染色時間,或按照說明書比例增加染色液濃度后重新染色。
00001. 未檢測到目標蛋白條帶:檢查蛋白上樣量是否過低,可適當增加上樣量并重做實驗。同時確認目標蛋白是否表達異常,可通過其他方法如 Western blot 進行驗證。
通過正確使用本蛋白快速染色液(免脫色),科研人員能夠高效、準確地對蛋白質進行染色分析,為科研工作提供有力支持。